MTT細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的使用注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2021-12-17 點(diǎn)擊次數(shù):1263次
MTT細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒是一種黃顏色的染料,被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的實(shí)驗(yàn)方法。由于細(xì)胞活力與細(xì)胞數(shù)呈正相關(guān),因此常常用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況。MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物。在特定溶劑存在的情況下,可以被*溶解,然后通過(guò)酶標(biāo)儀可以測(cè)定附近的吸光度。細(xì)胞增殖越多越快,則吸光度越高;細(xì)胞毒性越大,則吸光度越低。
MTT細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒MTT比色法是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜(Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無(wú)此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲臜,用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀測(cè)定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測(cè)、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測(cè)定等。它的特點(diǎn)是靈敏度高、經(jīng)濟(jì)。
MTT細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的使用注意事項(xiàng):
1.MTT溶劑在低溫情況下會(huì)凝固,使用前請(qǐng)室溫放置或水浴溫育片刻至全部融解后使用。
2.MTT一般最好避光保存,避免反復(fù)凍融,最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解,尤其當(dāng)MTT變?yōu)榛揖G色時(shí)就絕對(duì)不能再用了。
3.MTT用的時(shí)候小心,最好帶透明的簿膜手套,配成的MTT需要無(wú)菌,MTT對(duì)菌很敏感。
4.MTT法只能用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞相對(duì)數(shù)和相對(duì)活力,但不能測(cè)定細(xì)胞絕對(duì)數(shù)。MTT一般最好現(xiàn)用現(xiàn)配,過(guò)濾后避光保存兩周內(nèi)有效。